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一、在动物检疫中对生猪及其产品开展非洲***病毒检测，应当使用我部批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法及检测***盒（试纸条），确保检测结果准确。符合要求的检测方法及检测***盒（试纸条）可从中国动物疫病预防控制中心网站查询。二、应急期间，比对符合要求的检测***盒（试纸条）可使用至2019年6月30日。注意：这里说的时间，不单纯是消毒所用的时间，更重要的是病原体与消毒i药接触的有效时间。三、各地畜牧兽医管理部门要加强对非洲***病毒检测***盒（试纸条）生产企业及其产品质量监管，确保产品质量符合要求。

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猪肉制品加工企业在生猪产品原料中检出非洲***病毒核酸阳性的，应当立即封存阳性样品的同批次原料并报告所在地市场监管、畜牧兽医部门，并将阳性样品送至具有检测资质的单位复检。复检为阳性的，企业要在当地市场监管、畜牧兽医部门监督下，按规定对同批次生猪产品原料进行无害化处理，对相关场所进行彻i底清洗消毒。分子遗传学诊断技术多以遗传物质DNA为检测对象，不需要进行细胞培养，为传统的细胞染色体核型分析技术提供了有效的补充。

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PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数方式增加的，随着反应循环数的增加，***终PCR反应不再以指数方式生成模板，从而进入平台期。在传统的PCR中，常用凝胶电泳分离并用荧光染色来检测PCR反应的***终扩增产物，因此用此终点法对PCR产物定量存在不可靠之处。在real-time Q-PCR中，对整个PCR反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号，随着反应时间的进行，监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。广州劢博--养殖场核酸提取纯化传统的PCR定量是应用终点PCR来对样品中的模板量进行定量,通常用凝胶电泳分离,并用荧光染色来检测PCR反应的***终扩增产物。

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在PCR反应早期，产生荧光的水平不能与背景明显地区别，而后荧光的产生进入指数期、线性期和***终的平台期，因此可以在PCR反应处于指数期的某一点上来检测PCR产物的量，并且由此来推断模板***i初的含量。为了便于对所检测样本进行比较，在real-time Q-PCR反应的指数期，首先需设定一定荧光信号的域值，一般这个域值（threshold）是以PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号（baseline），荧光域值的缺省设置是3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。如采用常规的终点检测法（利用EB染色来判断扩增产物的多少，从而间接的判断起始拷贝量），即使起始模板量相同经PCR扩增、EB染色后也完全有可能得到不同的终点荧光信号强度。

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定量PCR已经从基于凝胶的低通量分析发展到高通量的荧光分析技术，即实时定量PCR。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时定量PCR (real-time quantitative PCR)是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的***的初始量，不需要取出PCR产物进行分离。而在平台期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR的终产物量与起始模板量之间没有线性关系，根据***终的PCR产物量也不能计算出起始DNA拷贝数。

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；01℃的定量PCR仪，而该公司新近推出的Rotor-Gene6000更可达到±0。PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.